土壤纖維素酶（S-CL）活性檢測(cè)試劑盒 Soil Cellulase (S-CL) Activity Assay Kit 一、土壤纖維素酶（S-CL）活性檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品描述 土壤纖維素酶（S-CL）主要來(lái)源于土壤微生物，催化秸稈纖維中 β-1,4-葡萄糖苷鍵，使其轉(zhuǎn)變?yōu)?纖維二糖和葡萄糖，產(chǎn)物為微生物可優(yōu)先利用的碳源營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在土壤碳素代謝中起著重要的作用。 土壤纖維素酶可催化纖維素降解產(chǎn)生還原糖，進(jìn)一步與 3,5-二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基 化合物，產(chǎn)物在 540 nm 處具有特征吸收峰，通過(guò)吸光值的變化即可表征土壤纖維素酶的活性。
二、土壤纖維素酶（S-CL）活性檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品內(nèi)容
三、土壤纖維素酶（S-CL）活性檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明
測(cè)定過(guò)程中所需要的儀器和試劑：可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、可調(diào)式移液器、恒溫水 浴/培養(yǎng)箱、烘箱、30-50 目篩、甲苯和蒸餾水。 1. 土壤樣本的處理 新鮮土樣自然風(fēng)干或 37℃烘箱風(fēng)干，過(guò) 30-50 目篩。 2. 測(cè)定步驟 ①分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 540 nm，蒸餾水調(diào)零。 ②在離心管中依次加入下列試劑（可根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量）： 測(cè)定管振蕩混勻，室溫放置 15 min 對(duì)照管沸水浴處理 15 min（密封以防止水分散失） 振蕩混勻，40℃水浴糖化 1 h， 沸水浴處理 15 min（密封以防止水分散失），即為糖化液 沸水浴顯色 15 min（密封以防止水分散失），冷卻至室溫 吸光值測(cè)定：測(cè)定 540 nm 處吸光值，記為 A 測(cè)定、A 對(duì)照、A 標(biāo)準(zhǔn)和 A 空白；計(jì)算?A 測(cè)定=A 測(cè)定-A 對(duì)照，?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白。注：每個(gè)測(cè)定管均需設(shè)一個(gè)對(duì)照管，空白管只需測(cè)定 1-2 次。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：以 2.0、1.5、1.0、0.5、0.25、0.125 mg/mL 為橫坐標(biāo)（x），以其對(duì)應(yīng)的?A 標(biāo)準(zhǔn) 為縱坐標(biāo)（y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程 y=kx+b，將?A 測(cè)定帶入公式中得到 x（mg/mL）。 1. 土壤纖維素酶（S-CL）活性計(jì)算 單位定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1 mg 葡萄糖定義為一個(gè)酶活力單位。 注釋：V 反總：反應(yīng)體系總體積：1.625 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，1 h=1/24 d；W：樣本質(zhì)量，0.25 g。
四、土壤纖維素酶（S-CL）活性檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品注意事項(xiàng) ①若?A 測(cè)定超出標(biāo)準(zhǔn)線性吸光值范圍，超出最高值可將糖化液適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，低于最 低值可適當(dāng)延長(zhǎng)糖化時(shí)間，計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改； ②為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失，測(cè)定前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)（以實(shí)際收到說(shuō)明書(shū)內(nèi)容為準(zhǔn)）， 確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分，操作步驟是否清楚，且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)定， 過(guò)程中問(wèn)題請(qǐng)您及時(shí)與工作人員聯(lián)系。
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