1、一個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)幾個(gè)樣品？ 小編自己在各大論壇看到最多的三個(gè)答案： 1）48T 可做42個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線；96T 可做90個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線 2）以96T試劑盒來算，定量的試劑盒一般可以做90個(gè)左右的樣品，定性的試劑盒可以做94個(gè)左右的樣品 3）96T的ELISA試劑盒，去除標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔檢測(cè)，最多還能檢測(cè)80個(gè)標(biāo)本；48T的最多30個(gè)樣本。 2、elisa試劑盒96T的能做檢測(cè)多少血清樣品？板能重復(fù)利用嗎？ 96T，一般做復(fù)孔的話，做標(biāo)準(zhǔn)曲線需要16個(gè)孔，剩下80個(gè)孔就可以做40個(gè)樣本。這個(gè)板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。 3、想請(qǐng)教一下，我想用elisa法測(cè)血清里的一種抗原，查了資料，發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用，現(xiàn)在就有2種備選方案，一種是買抗體對(duì)自己包被（查了R&D等大公司都沒有可用于elisa的單抗）。哪種比較好呢？自己包被的會(huì)不會(huì)比國產(chǎn)的試劑盒可靠呢？ 如果你覺得技術(shù)不錯(cuò)有隊(duì)其他公司不放心，可以自己購買抗體對(duì)自己包被，這個(gè)就是麻煩點(diǎn)，自己包被用著放心，舒心； 另外國內(nèi)還是有一些資質(zhì)不錯(cuò)的公司，如北京達(dá)科為，上海巧伊，依科賽，深圳欣博盛等等 4、western 和ELISA 處理樣本有何差別？ Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復(fù)凍融。 ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul，做復(fù)孔，每個(gè)樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時(shí)要大于200ul每支），直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存，一樣避免反復(fù)凍融。 不過ELISA最好少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，或者查閱文獻(xiàn)，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測(cè)量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測(cè)量不準(zhǔn)，或者濃度過低，小于試劑盒最低可測(cè)濃度。 5、Elisa試劑盒該買哪家公司的呢？ 提出這個(gè)問題的朋友其實(shí)該打，目前國際上各個(gè)品牌的試劑盒生廠商，都會(huì)有其偏重點(diǎn)，像R&D在細(xì)胞因子方面的試劑盒就非常牛逼，而其他牌子也一樣的。 Bender：粘附分子方面的試劑盒； Cayman：花生四烯酸類產(chǎn)品的試劑盒； Merck(Linco)：內(nèi)分泌研究方面的試劑盒； Tips：
1、買Elisa試劑盒時(shí)，盡量先查文獻(xiàn)，通過文獻(xiàn)找品牌，再找供應(yīng)商，找供應(yīng)商就找正規(guī)代理商，千萬不要去干“賠夫人又折兵”的蠢事。 2、ELISA中，復(fù)孔就是同一個(gè)樣品加到至少兩個(gè)孔中（一般3個(gè)或4個(gè)），最后取其平均值作為樣品的讀數(shù)，這樣測(cè)得的結(jié)果才有說服力！ 做復(fù)孔是為了較好的較少組內(nèi)差異，如果血清不足不做復(fù)孔也可以。
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