PeproTech的一個(gè)ELISA試劑盒（EDK）能檢測(cè)多少塊板？
一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)ELISA試劑盒所含組分足夠檢測(cè)10塊96孔板，而一塊Mini ELISA試劑盒所含組分足夠檢測(cè)2塊96塊。
2. PeproTech ELISA試劑盒中所含的HRP結(jié)合物的穩(wěn)定性如何？ ABTS ELISA試劑盒中的Avidin-HRP 在2-8℃最多穩(wěn)定一個(gè)月，分裝并凍存于-20℃以下則可最長(zhǎng)穩(wěn)定2年，避免反復(fù)凍融。TMB ELISA試劑盒中的鏈霉親和素-HRP可以在2-8℃中穩(wěn)定半年。
3. 如何獲得試劑盒的交叉反應(yīng)信息？ PeproTech在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)自行測(cè)試了其ELISA試劑盒的交叉反應(yīng)性，可在說明書中查看測(cè)試結(jié)果。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)過程中如果想周末停一下怎么辦？ 可以在周五用包被抗體包板，然后放4℃保存，下周一再繼續(xù)實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)注意：抗體包被時(shí)間的改變可能會(huì)引起板間結(jié)果的差異。
5. PeproTech的EDK是否適用于所有類型的樣本？ 雖然PeproTech沒有用其試劑盒對(duì)每種樣本進(jìn)行測(cè)試，但這些試劑盒應(yīng)該適用于（但不僅限于）以下標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、尿液和唾液。
6. 顯色反應(yīng)需要終止嗎？ Avidin-HRP和底物ABTS的顯色反應(yīng)是不需要終止的，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品的零孔OD值小于0.2，或最高濃度孔OD值小于1.2時(shí)，通常可以獲得可靠的標(biāo)準(zhǔn)曲線，如要終止顯色反應(yīng)，可以用1%SDS作為終止液。雖然資料顯示SDS是ABTS的最適終止液，但PeproTech并未在實(shí)驗(yàn)室中使用終止液。
7. PeproTech的ABTS EDK可以用TMB作為底物嗎？ PeproTech的EDK是用ABTS進(jìn)行優(yōu)化的，因此最好使用ABTS作為底物，這些試劑盒也與TMB配合使用，但需要做一些調(diào)整： ? 試劑盒中的Avidin-HRP不能與TMB配對(duì)，必須另購(gòu)鏈霉親和素-HRP； ? 鏈霉親和素-HRP的工作濃度需要優(yōu)化； ? 使用鏈霉親和素-HRP和TMB時(shí)，通常需用終止液，請(qǐng)按照說明書操作； ? 加終止液前，TMB的反應(yīng)時(shí)間需要優(yōu)化； ? 使用推薦的酶標(biāo)板，并在450nm讀取吸光值，校正波長(zhǎng)為650nm。
8. EDK組分中為什么要添加D-甘露醇？ 在EDK組分中加入D-甘露糖的目的是使蛋白/抗體可見，這不會(huì)影響ELISA的檢測(cè)結(jié)果。
9. 是否可以將EDK說明書中的曲線作為我的標(biāo)準(zhǔn)曲線？ 每塊ELISA板必須單獨(dú)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，也就是說，一塊板的標(biāo)準(zhǔn)曲線不能用于另一塊板，PeproTech的EDK說明書中提供的標(biāo)曲是在自己的實(shí)驗(yàn)室中做出來的，僅可用作示例。
10. PeproTech的標(biāo)準(zhǔn)曲線是如何生成的？ 在實(shí)驗(yàn)室中做ELISA時(shí)，PeproTech會(huì)用Molecular Devices公司的酶標(biāo)儀讀取吸光值，然后用SOFTmax PRO軟件進(jìn)行結(jié)果分析，該軟件能將獲取的數(shù)據(jù)進(jìn)行四參數(shù)曲線擬合。
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