ELISA試劑盒在實(shí)際的操作過(guò)程中需要注意哪些？今天上海原鑫生物科技公司小編就與大家一同分享一下，總體來(lái)說(shuō)ELISA試劑盒的操作過(guò)程中有以下多點(diǎn)需要注意。
1. ELISA試劑盒為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)運(yùn)用，試劑應(yīng)視為感染物，不同總批號(hào)的試劑是不可以一起混用的，這點(diǎn)值得注意。 2. ELISA試劑盒在操作運(yùn)用之前應(yīng)當(dāng)將盒內(nèi)的各種小瓶試劑都去除，正常室溫情況下需要放置至少30分鐘。 3. 濃縮洗刷液變成結(jié)晶后，于37°C孵育15分鐘。 4. 如果24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn).標(biāo)本可存放于2?8℃。不需及時(shí)試驗(yàn).標(biāo)本-20℃保存，防止反復(fù)凍融。 5. 試劑盒保存于2?8°C. 不可以冷凍，有效期在試劑盒內(nèi)都會(huì)標(biāo)明，請(qǐng)認(rèn)真閱讀。 6. 加樣結(jié)束后.應(yīng)注意細(xì)微搖擺微孔反響條.以便使孔中的液體充沛混勻。 那么ELISA試劑盒操作過(guò)程又是如何的呢：
1.取出酶標(biāo)板，設(shè)空白孔，按照次第對(duì)應(yīng)別離參加100μl的規(guī)范品于空白微孔中（空白孔視為0號(hào)規(guī)范品，用醫(yī)用蒸餾水代替）
2.別離標(biāo)記樣品編號(hào)，參加100μl的稀釋樣品于空氣微孔中（不同的樣本選用不同的吸頭）。
3.將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘
4.將酶標(biāo)板板取出，將其間的液體甩去，每個(gè)孔中悉數(shù)加滿(mǎn)使用洗刷液后，當(dāng)即甩去液體。
5.每個(gè)孔中加滿(mǎn)使用洗刷液后，細(xì)微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的使用洗刷液甩去，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
6.重復(fù)第5個(gè)過(guò)程5次，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
7.在規(guī)范品孔和樣品孔中參加的100μl的酶標(biāo)巧合溶液。
8.將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9.將酶標(biāo)板取出，將其間的液體甩去，每個(gè)孔中悉數(shù)加滿(mǎn)使用洗刷液后，當(dāng)即甩去液體。
10.每個(gè)孔中再次加滿(mǎn)洗刷使用液后，室溫細(xì)微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的使用洗刷液甩去，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
11.重復(fù)第5個(gè)過(guò)程5次，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
12.在每個(gè)孔中參加底物A 50μl后當(dāng)即參加底物B 50μl。悄悄振動(dòng)混勻。（A液.B液使用不同的吸頭加樣）
13.將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反響15分鐘。
14.每個(gè)微孔中參加50μl的停止液，悄悄振動(dòng)混勻。
15.在酶標(biāo)儀上，450nm處測(cè)定OD；顯色后，15分鐘內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。
16.依據(jù)制備的規(guī)范曲線，核算樣本含量。 以上小編不僅說(shuō)明了對(duì)于ELISA試劑盒在實(shí)際操作過(guò)程中需要注意的多項(xiàng)事項(xiàng)，同時(shí)也對(duì)ELISA試劑盒的樣本進(jìn)行了說(shuō)明，而在日常實(shí)際過(guò)程中大家需要使用的時(shí)候盡量以ELISA試劑盒內(nèi)部的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行閱讀分析后進(jìn)行操作，如有更多疑問(wèn)可登錄原鑫生物科技有限公司（上海）www.bio-shyx.com尋求專(zhuān)業(yè)ELISA試劑盒操作的研究人員咨詢(xún)。 |
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